INVESTIGACIONES NANOTECNOLÓGICAS SOBRE LAS VACUNAS CONTRA COVID-19: Detección de nanopartículas tóxicas de óxido de grafeno y metales pesados

Publié par Contra información sur 15 Septembre 2021, 18:00pm

Scientists Club

Introducción

La nueva pandemia de CoVID19 ha llevado a la industria farmacéutica a desarrollar nuevos fármacos con denominación de “vacunas”. Sin embargo, los mecanismos de acción de estos nuevos fármacos declarados por las industrias farmacéuticas, junto con lo informado en la ficha técnica de los productos, sugiere que esos productos no deberían considerarse vacunas convencionales, sino fármacos nanotecnológicos con función de terapia genética.

Es posible que el empleo de la denominación de “vacunas” sea una estrategia encaminada a conseguir autorizaciones para uso de emergencia, sorteando así los requisitos necesarios para la aprobación de nuevos medicamentos, especialmente para los que implican mecanismos nanotecnológicos novedosos, con escasos datos clínica sobre seguridad y eficacia. Si bien las patentes de estas vacunas han sido aprobadas, las autorizaciones para uso de emergencia se han obtenido con fundamento exclusivo en documentos aportados por las propias compañías farmacéuticas, y no nos consta la realización de contra-análisis de composicion química independientes por las agencias reguladoras nacionales. Por tanto la composición real de los lotes distribuidos a la población es conocida sólo por los fabricantes. Así, las personas a las que se propone la vacunación carecen de información real, actualizada y certificada sobre lo que se va a inocular en sus cuerpos. Se les mantiene en la oscuridad en lo que respecta a los procesos nanotecnológicos implicados, sobre los riesgos de reacciones adversas a corto, medio y largo plazo, y sobre las posibles nano-bio-interacciones que pueden ocurrir en un futuro por la inoculación de sustancial de potencial toxicidad.

El presente estudio es un muestreo aleatorio de algunas muestras de vacunas COVID19, a través de análisis y observaciones directas mediante instrumentación nanotecnológica. No se trata de un muestreo estadísticamente significativo, ni de una análisis concluyente, completo y definitivo del contenido de las vacunas para COVID19, sino de un llamamiento a implementar contraanálisis rutinarios independientes, con trasparencia pública, de los diferentes lotes que vayan a ser inoculados masivamente a poblaciones humanas incluyendo grupos de riesgo.

Materiales y métodos

Se analizaron muestras de viales de cuatro “vacunas COVID” comercializadas por Pfizer-Biontech, Vaxzevria de Astrazeneca, Janssen de Johnson & Johnson, y Moderna) utilizando diferente instrumentación y protocolos de preparación según un enfoque de análisis nanotecnológico: Microscopía Óptica de Campo Claro y Oscuro, Espectroscopia de Absorbancia y Fluorescencia UV, Microscopios Electrónicos de Barrido (MEB, o SEM en inglés), Microscopios Electrónicos de Transmisión (TEM por su sigla en inglés, o MET en español), Espectroscopios de Energía Dispersiva (EDS, o EDXRF) , espectroscopía Ultravioleta (UV-Vis) y Resonancia Magnética Nuclear (RMN, o NMR en inglés).

Debido a la brevedad de este informe, presentamos aquí un resumen de resultados representativos de un cuerpo de datos observacionales mucho mas más amplios. Los análisis se centraron en la recogida de imágenes por microscopía de cuerpos de dimensión nanométrica presentes y en el análisis de su composición química por espectroscopía EDS. Las siguientes imágenes presentan de forma objetiva objetos detectados en las muestras.

En primer lugar, la figura 1 muestra liposomas que, según Pfizer declara, servirían para vehiculizar moléculas de ARNm dentro del organismo tras la inoculación.

Figura 1. Preparación SEM-Cryo de vacuna Pfizer.

Microscopía Óptica y Electrónica (TEM) (Campra, 2021)

Una muestra de la patente COMIRNATY^TM , comercializada por Pfizer-Biontech, fue procesada en condiciones de refrigeración y esterilidad, utilizando campana de flujo laminar y material de laboratorio esterilizado. Los pasos para los análisis fueron:

Dilución en solución salina fisiológica estéril al 0,9% (0,45 ml + 1,2 ml)
Fraccionamiento de la polaridad: 1,2 ml de hexano + 120 ul de muestra RD1
Extracción de la fase acuosa hidrofílica
Escaneo de espectroscopia de absorbancia y fluorescencia UV
Extracción y cuantificación del ARN de la muestra
Microscopía electrónica (TEM) y óptica de la fase acuosa

En primer lugar se obtuvieron imágenes de la fracción acuosa de mediante microscopía óptica para evaluar visualmente la posible presencia de nanopartículas. Las observaciones al microscopio óptico de la misma revelaron la abundancia de objetos laminares 2D transparentes que muestran gran similitud con las imágenes de óxido de grafeno (GO, en inglés) de la literatura (Xu et al, 2019), y con las imágenes obtenidas de rGO (óxido de grafeno reducido) estándar (SIGMA)(Figuras 2a,b). Se obtuvieron imágenes de dos tipos de objetos bidimensionales (2D). En primer lugar grandes láminas transparentes de tamaño y formas variables, mostrando objetos 2D ondulados y planos e irregulares. En segundo lugar, abundantes láminas más pequeñas de formas poligonales, también similares a las escamas descritas en la literatura como GO (Xu et al, 2019) pueden ser reveladas con microscopía de campo oscuro (Fig 2c). Ambos tipos de objetos laminares similares al GO estaban esparcidos en la fracción acuosa de la muestra. Ningún componente descrito por la patente registrada puede asociarse a estos objetos laminares.

Fig. 2a. Imagen de la fracción acuosa de la muestra de la vacuna de Pfizer y del óxido de grafeno reducido (rGO) estándar previamente sonicado (derecha) (Sigma-777684). Microscopía óptica, 100X (Campra, 2021)

Figura 2b. Imágenes de la fracción acuosa de láminas 2D de la muestra de la vacuna de Pfizer (izquierda) y del estándar de óxido de grafeno reducido (rGO) sonicado (derecha) (Sigma-777684). Microscopía óptica, 600X (Campra, 2021)

Figura 2c. Imágenes de la fracción acuosa de pequeños objetos laminares de la muestra de la vacuna de Pfizer. Microscopía de campo oscuro, 600X (Campra, 2021)

Microscopía Electrónica de Transmisión (Campra, 2021)

En la figura 3 mostramos 3 imágenes de la muestra de Comirnaty^TMcon niveles crecientes de aumento. Las imágenes TEM de la fracción acuosa de la muestra muestran una gran similitud con las imágenes TEM de óxido de grafeno de la literatura (figura 4, de Choucair et al, 2009). Se observa una intrincada matriz o malla de láminas flexibles translúcidas plegadas, con una mezcla de aglomeraciones multicapa más oscuras y monocapas desplegadas de color más claro. Aparecen zonas lineales más oscuras debido al solapamiento local de las láminas y a la disposición local de las láminas individuales en paralelo al haz de electrones. Tras la malla, aparece una alta densidad de formas claras redondeadas y elípticas no identificadas, que posiblemente correspondan a agujeros generados por el forzamiento mecánico de la malla durante el tratamiento. Estas formas elípticas no corresponden con el soporte de carbono empleado en TEM, sino son producto de deformaciones en la morfología de las mallas de la muestra.

Fig. 3. Fracción acuosa de la muestra Comirnaty^TM. Microscopio electrónico (TEM), JEM-2100Plus, a 200 kV (Campra, 2021)

Figura 4. Imágenes TEM de óxido de grafeno a dos aumentos (de Choucair et al 2009).

Aunque las imágenes de estas láminas presentan gran similitud con el patrón rGO descrito en la literatura, para una identificación definitiva del grafeno por TEM, es necesario obtener un patrón de difracción de electrones hexagonal característico. Debido a la falta de muestra para su posterior procesamiento no ha sido posible obtenerlo por ahora. Hemos obtenido este patrón a partir de la muestra estándar de rGO (datos no mostrados).

Cuantificación del ARN en Comirnaty (Campra, 2021)

La cuantificación del ARN en la muestra se realizó con protocolos convencionales (Fisher). Según el software específico de comprobación de calibración del espectrofotómetro NanoDrop^TM2000 (Thermofisher), el espectro de absorción UV de la fracción acuosa total se correlacionó con 747 ng/ul de sustancias absorbentes desconocidas (Fig. 5). Sin embargo, tras la extracción del ARN con un kit comercial (Thermofisher), la cuantificación con la sonda de fluorescencia Qbit específica para ARN (Thermofisher) mostró que sólo 6 ng/ul podían relacionarse con la presencia de ARN. El espectro era compatible con el pico del rGO a 270 nm, así como con muchas otras sustancias que presentan grupos cromóforos en ese máximo de absorción. Según las imágenes microscópicas presentadas aquí, la mayor parte de esta absorbancia podría deberse a las láminas 2D observadas similares al grafeno, abundantes en suspensión en la muestra. Esta tesis fue apoyada además por la alta fluorescencia de la muestra con un máximo a 340 nm, de acuerdo con los valores del pico para el rGO. Hay que recordar que el ARN no muestra fluorescencia espontánea bajo la exposición a los rayos UV.

Fig. 5. Espectro UV de la fracción acuosa de la muestra de la vacuna Pfizer. (Campra, 2021)

Referencias para la preparación 1,2,3

Fluorescencia UV de la fracción acuosa

Figura 6. Espectros de fluorescencia UV de la fracción acuosa del vial Comirnaty^TM. Longitud de onda de excitación: 300 nm. (Campra, 2021)

Los espectros de absorción y fluorescencia UV se obtuvieron complementariamente con el espectrofotómetro Cytation 5 Cell Imaging Multi-Mode Reader (BioteK) (Fig. 6). El espectro de absorbancia UV confirmó un pico máximo a 270 nm, compatible con la presencia de rGO. El máximo de fluorescencia UV a 340 nm también es compatible con la presencia de cantidades significativas de rGO en la muestra (Bano y otros, 2019).

Microscopio Electrónico de Barrido Ambiental (ESEM) acoplado a una microsonda de un sistema de Fluorescencia de Rayos X por Energía Dispersiva (EDS)

Las siguientes imágenes muestran diferentes partículas identificadas en las “vacunas” de Pfizer, Moderna, Astrazeneca y Janssen, analizadas con un Microscopio Electrónico de Barrido Ambiental (ESEM) acoplado a una microsonda de un sistema de Fluorescencia de Rayos X por Energía Dispersiva (EDS), que revela la naturaleza química de los residuos observados.

Figura 7. Imagen de Microscopio Electrónico de Barrido de una nanopartícula en la vacuna de Pfizer

La Fig. 7 muestra un grupo de nanopartículas de grafeno en una vacuna de Pfizer. Parecen estar aglomeradas. El espectro EDS informa de la presencia de carbono, oxígeno y cloruro de sodio, ya que el producto está diluido en una solución salina.

Fig.8 Espectro EDS de una “vacuna” de Pfizer bajo un microscopio ESEM acoplado a una microsonda de rayos X EDS (eje X =KeV, eje Y = Conteos)

La Fig.8 muestra un raro cuerpo extraño, se puede observar un cuerpo extraño de 50 micras de largo, una presencia no identificada en una vacuna, con agujeros en la superficie. Los residuos blancos están compuestos por Carbono, Oxígeno, Aluminio, Silicio, Calcio, Magnesio, Cloro y Nitrógeno.

Fig. 9 Cuerpo extraño afilado de 20 micras de longitud identificado en una “vacuna” de Pfizer. Se compone de carbono, oxígeno, cromo, azufre, aluminio, cloruro y nitrógeno.

Fig. 10 Cuerpo extraño identificado en una “vacuna” de Pfizer. La partícula blanca de 2 micras de longitud está compuesta de bismuto, carbono, oxígeno, aluminio, sodio, cobre y nitrógeno.

Fig. 11. Aglomerado orgánico (carbono-oxígeno-nitrógeno) con nanopartículas incrustadas de bismuto-titanio-vanadio-hierro-cobre-silicio-aluminio incrustadas en la “vacuna” de Pfizer.

Fig. 12. Aglomerado de nanopartículas de hierro-cromo-níquel (acero inoxidable) incrustadas identificado en una "vacuna" de Astrazeneca.

Fig.13. Un aglomerado orgánico-inorgánico identificado en una “vacuna” de Janssen. Las partículas están compuestas de acero inoxidable.

Algunos metales presentes en los aglomerados , como la fig. 13, son magnéticos y pueden desencadenar problemas biológicos dentro de la circulación sanguínea debido a posibles interacciones con otros dipolos

Fig. 14. Una entidad mixta (orgánica-inorgánica) identificada en una “vacuna” de Moderna. Se trata de un sustrato a base de carbono en el que están incrustadas algunas nanopartículas. Las nanopartículas están compuestas de aluminio-cobre-hierro-cloro.

Fig. 15 Análisis EDS de la “vacuna” Moderna.

Se identificaron muchos cuerpos extraños con una morfología esférica con algunas cavidades en forma de burbuja. Están compuestos de Silicio-Plomo-Cadmio-Selenio. Esta composición altamente tóxica recuerda a la de los puntos cuánticos (seleniuro de cadmio).

Fig. 16. La “vacuna” Moderna muestra una entidad de 100 micras. Está compuesto de carbono y oxígeno con contaminación de nitrógeno, silicio, fósforo y cloro.

Fig. 17. Entidades a base de carbono en una “vacuna” de Moderna mezcladas con aglomerados rellenos de partículas de silicato de aluminio

XRF (fluorescencia de rayos X)

Los análisis XRF revelan la parte orgánica de la que está compuesta la “vacuna” de Astrazeneca. La abundancia de C y H probablemente se debe a la presencia mayoritaria de sacarosa en la formulación.

Fig. 18: Espectro ¹H de la vacuna AstraZeneca

Mediante la instrumentación XRF se identificaron las siguientes moléculas: histidina, sacarosa, PEG (polietilenglicol) y alcohol etílico (etanol). La presencia de sacarosa y PEG se declara en la ficha técnica de esta “vacuna”. Las señales de RMN y XPS (Espectroscopia de Fotoelectrones Emitidos por rayos X) de la señal acuosa responden al patrón de la sacarosa, por lo que es necesario un mayor procesamiento y fraccionamiento de las muestras para obtener espectros de otras sustancias desconocidas en las muestras con estas técnicas.

En la Fig. 18, se utilizan diferentes colores para las cuatro moléculas identificadas mediante los espectros de referencia. La concentración relativa se calcula sobre las integrales de las señales de referencia de las moléculas en un espectro cuantitativo adquirido con un ciclo de trabajo de 5 segundos, ya que el T1 calculado más largo fue de 5 segundos.

DISCUSIÓN

En nuestro limitado muestreo aleatorio de vacunas “contra” COVID19, hemos encontrado evidencias preliminares de la presencia de nanopartículas de potencial toxicidad que no están declaradas en las fichas técnicas de los fabricantes, como metales pesados y posiblemente óxido de grafeno. Dado que no se incluyen en la documentación presentada a las agencias reguladoras de EE.UU. y la UE (FDA, EMA, etc.) para las autorizaciones de emergencia obtenidas para su uso urgente en humanos, AQUÍ DENUNCIAMOS QUE SE DEBE HACER UN CONTRAANÁLISIS exhaustivo e independiente a todas las vacunas COVID19, incluyendo un muestreo debidamente diseñado de diferentes lotes a lo largo del periodo de vacunación.

Se desconoce si estas nanopartículas se introdujeron por contaminación durante el proceso de fabricación o se incluyeron intencionadamente en las formulaciones. Por lo que sabemos, no se ha hecho ni publicado NINGÚN ANÁLISIS OFICIAL DE LOS ORGANISMOS REGULADORES. Revisando el proceso de autorización de emergencia, parece que el control del producto final antes de su distribución SE BASA ÚNICAMENTE EN DOCUMENTOS PROPORCIONADOS POR LOS FABRICANTES. Esto significa que los consumidores no están completamente informados del contenido real de los productos, por lo que el requisito obligado de consentimiento informado para participar en los medicamentos experimentales no se ha presentado a los participantes. Los posibles efectos adversos, incluida la muerte, notificados al VAERS y a otros sistemas, podrían ser causados por la inoculación de esos contaminantes en el organismo. Hay que observar que los componentes no declarados, pero que hemos identificado, no son biocompatibles y algunos tienen además un impacto físico una vez que están dentro de la circulación sanguínea, especialmente en contacto con el endotelio vascular, con potencial actividad trombótica. Las nanopartículas encontradas en las “vacunas” de Pfizer y Astrazeneca, pueden representar un riesgo potencial para el cuerpo humano, debido a su conocida toxicidad. Pueden ser responsables de la formación de trombos ya que son trombogénicas. Otro riesgo lo representa la extravasación de las partículas con la consiguiente posible hemorragia. Una vez en la circulación sanguínea, las partículas pueden ser transportadas también al cerebro. En este caso, el paciente puede sufrir una apoplejía y/o una hemorragia cerebral. Si el daño del endotelio causado por las partículas se produce en el corazón, existe una alta probabilidad de contraer miocarditis opericarditis. Además de todo esto, la toxicidad del grafeno es bien conocida (Volkov et al, 2017), por lo que su presencia en los lotes según nuestras observaciones preliminares debe ser cuidadosamente controlada.

Referencias

Bano, I. et al , 2019. Exploración de las propiedades de fluorescencia del óxido de grafeno reducido con rendimiento de dispositivo ajustable, Diamond and Related Materials, Volumen 94, pgs 59-64, ISSN 0925-9635, https://doi.org/10.1016/j.diamond.2019.02.021.

Biroju, Ravi & Narayanan, Tharangattu & Vineesh, Thazhe Veettil. (2018). Nuevos avances en electroquímica 2D-Catálisis y Detección. 10.1201/9781315152042-7.

Campra, 2021. Detección de oxido de grafeno en suspensión acuosa (Comirnaty^TM (RD1) Estudio observacional en microscopia óptica y electrónica. Informe provisional (I). Agosto 2021. DOI: 10.13140/RG.2.2.36808.65280.

Choucair, M., Thordarson, P. & Stride, J. Producción a escala de gramo de grafeno basada en la síntesis solvotérmica y la sonicación. Nature Nanotech 4, pgs 30-33 (2009). https://doi.org/10.1038/nnano.2008.365.

Hack R. y otros, 2018 . Caracterización de nanohojas de grafeno obtenidas por un método de Hummer modificado. Matéria (Rio J.) 23 (1)

Kim et al, Ver láminas basadas en grafeno, Materials Today, Volumen 13, Edición 3, 2010, Páginas 28-38, ISSN 1369-7021, https://doi.org/10.1016/S1369-7021(10)70031-6.

Volkov Y. et al, 2017. La toxicidad del grafeno como una espada de doble filo de riesgos y oportunidades explotables: un análisis crítico de las tendencias y desarrollos más recientes. 2D Mater. 4 022001

Xu et al, (2019) Identificación del óxido de grafeno y sus características estructurales en disolventes mediante microscopía óptica, RSC Adv., 9, 18559-18564

Métodos de cuantificación de ARN:

Kit de 1-Extracción de ARN https://www.fishersci.es/shop/products/ambion-purelink-rna-mini-kit-7/10307963

2- NanoDropTM

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/ND-2000#/ND-2000

3-QUBIT2.0: https://www.thermofisher.com/es/es/home/references/newsletters-and-journals/bioprobes-journal-of-cell-biology-applications/bioprobes-issues-2011/bioprobes-64-april-2011/the-qubit-2-0-fluorometer-april-2011.html

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